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Annexin V-FITC染色液
貨號:P-CA-101
價格:¥780¥1200¥1880¥3780
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產品概述
保存條件
2~8℃可保存1年。Annexin V-FITC禁止冷凍保存。
產品簡介
Annexin V-FITC 染色液用于鑒定凋亡細胞。
Annexin V是一種鈣離子依賴性磷脂結合蛋白,與磷脂酰絲氨酸 (PS) 有高度親和力。當細胞發生凋亡時,膜內側的磷脂酰絲氨酸 (PS) 外翻到膜表面,而被熒光染料FITC標記的Annexin V結合,可通過流式細胞儀或熒光顯微鏡進行檢測。
Annexin V搭配PI或7-AAD、DAPI等DNA染色液使用,可區分處于不同凋亡時期的細胞。
本試劑搭配PI檢測喜樹堿誘導的Jurkat細胞凋亡效果如下圖所示:
實驗操作
1. 細胞按照實驗方案進行凋亡誘導,300 ×g離心5 min,棄上清,收集細胞,PBS洗滌一次,輕輕重懸細胞并計數。
2. 取1~5×105重懸的細胞,300 ×g離心5 min,棄上清。用PBS洗滌細胞一次,離心后棄上清,加入500 μL稀釋的1 × Annexin V Binding Buffer重懸細胞。
3. 細胞懸液中加入5 μL的Annexin V-FITC染色液和5 μL的細胞核DNA染色液。
4. 輕柔渦旋混勻后,室溫避光孵育15~20 min。
5. 反應完成后立即上機檢測。如不能及時檢測,請于冰上避光靜置并于1小時內完成檢測。
注意事項
1. 本產品僅供科研使用。
2. 檢測貼壁細胞時,需收集誘導凋亡后產生的懸浮細胞,并與后續收集的貼壁細胞一起檢測。
3. 應盡量避免消化貼壁細胞帶來的機械損傷。同時,胰酶的消化液中應盡量不含EDTA,因為EDTA會影響Annexin V與磷脂酰絲氨酸的結合。
4. 如果使用含EDTA的胰酶,收集細胞后應充分清洗,確保EDTA被去除干凈。
5. 染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數量增加。
6. 熒光物質均易發生淬滅,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
7. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
(本試劑產品僅供科學研究或進一步生產使用,不可用于臨床診斷或治療)
產品手冊
參考文獻
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引用產品:P-CA-101
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作者:Xiaoyan Song, Jianhua Ma
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引用產品:P-CA-101